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喹諾酮類檢測(cè)試劑盒的試驗(yàn)步驟介紹點(diǎn)擊次數(shù):453 更新時(shí)間:2022-09-18

   喹諾酮類檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物喹諾酮類藥物和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗喹諾酮類藥物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留喹諾酮類藥物的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物喹諾酮類藥物的含量。
 
  將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上,洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。實(shí)驗(yàn)開始前需:將20×濃縮洗滌液用去離子水按1:19稀釋成工作洗滌液。
 
  1、編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
 
  2、加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)45分鐘。
 
  3、洗滌:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
 
  4、顯色:每孔加入底物液A50µl,再加底物液B50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
 
  5、終止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
 
  6、測(cè)吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定每孔吸光度值(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm)。測(cè)定應(yīng)終止反應(yīng)后在10分鐘內(nèi)完成。
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