- 產(chǎn)品描述
豬偽狂犬是由偽狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)引起的家畜和多種野生動(dòng)物發(fā)生一種急性傳染病。該病以發(fā)熱、奇癢、呼吸和神經(jīng)系統(tǒng)疾病為主要特征。患病動(dòng)物病死率高,但成年豬死亡率低,也不發(fā)生奇癢,妊娠母豬可導(dǎo)致流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和木乃伊胎,新生仔豬和斷奶仔豬死亡率較高。檢測(cè)特異性抗豬偽狂犬病毒抗體,可作為豬場(chǎng)偽狂犬疫苗的免疫監(jiān)測(cè)及該病輔助檢測(cè)指標(biāo)。
本試劑盒采用ELISA方法檢測(cè)豬血清中特異性抗偽狂犬病毒IgG抗體。本試劑靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,操作方便快速,可分多次使用。
【試劑組成】
1.預(yù)包被板 | 48T/96T; | 7. 終止液(6號(hào)液) | 1支; | |
2.酶結(jié)合物(1號(hào)液) | 1支; | 8. 陽(yáng)性對(duì)照品 | 1支; | |
3.濃縮洗滌液(2號(hào)液) | 1支; | 9. 陰性對(duì)照品 | 1支; | |
4.底物(3號(hào)液) | 1支; | 10.不干膠膜 | 1/2片; | |
5.顯色劑(4號(hào)液) | 1支; | 11.自封袋 | 1個(gè); | |
6.樣本稀釋液(5號(hào)液) | 1支; | 12.使用說(shuō)明書(shū) | 1份; |
【操作程序】
1.洗滌液配制 用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液(2號(hào)液)按1:10稀釋?zhuān)缛?0ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水充分混勻即為工作洗滌液。
2.樣本稀釋 用樣本稀釋液(5號(hào)液)將待檢血清樣本按1:100稀釋?zhuān)缛?ul樣本與495ul樣本稀釋液,混勻。陰性、陽(yáng)性對(duì)照品不用稀釋?zhuān)苯蛹訕印?/div>
3.加樣反應(yīng) 每次試驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔(分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照及樣本稀釋液100ul)。樣本檢測(cè)孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應(yīng)30分鐘后,甩去孔內(nèi)液體,每孔注滿(mǎn)工作洗滌液洗滌3次,每次均需停留1分鐘后再甩凈,拍干。
4. 加酶反應(yīng) 除空白對(duì)照孔外,每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液) 1滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后,甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
5.顯色反應(yīng) 加底物液(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各1滴,混勻,37℃避光顯色10分鐘。加終止液(6號(hào)液)1滴,終止反應(yīng)(加終止液后,藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色)并判讀結(jié)果。
【結(jié)果判斷】
陰性對(duì)照呈無(wú)色或淺黃色,陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色,表示試驗(yàn)有效。
以空白對(duì)照調(diào)零,用酶標(biāo)儀于450nm(630nm作參比波長(zhǎng))讀取吸光度(A值)。待檢孔A值大于陰性對(duì)照A值平均值的2.1倍者判為陽(yáng)性。如陰性對(duì)照A值的平均值低于0.08時(shí)按0.08計(jì)算。
【注意事項(xiàng)】
1.試劑盒于2-8℃保存,有效期12個(gè)月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。
2.未使用完的板條應(yīng)密封保存。
3.試劑盒中終止液具有腐蝕性,要小心使用。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無(wú)染菌、無(wú)血脂、無(wú)溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。
6. 37℃孵育時(shí),建議使用水浴箱。如無(wú)條件,可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應(yīng)并同時(shí)用不干膠膜封蓋板孔。
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