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豬口蹄疫間接血凝檢測?試劑

豬口蹄疫間接血凝檢測?試劑

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豬口蹄疫間接血凝檢測?試劑廠家,價格

  • 產(chǎn)品描述

豬口蹄疫間接血凝檢測試劑

產(chǎn)品咨詢:

O型口蹄疫正向間接血凝抗原使用說明書

臨床意義

       口蹄疫(foot-and-mouth disease,F(xiàn)MD)又稱口瘡熱,是由口蹄疫病毒引起的主要侵害偶蹄動物的急性、熱性、高度接觸性傳染病。檢測特異性口蹄疫抗體可作為該病疫苗免疫狀況及輔助診斷指標。

試劑組成

1. 間接血凝診斷抗原

1瓶;

 

2. 稀釋液

1瓶;

3. 陰性對照

1支;

 

4. 陽性對照

1支;

5. 使用說明書

1份;

 

 

 

操作程序

1. 待檢血清(每頭約0.5ml血清即可)56℃水浴滅活30分鐘。

2. 在血凝板上1-6排的1-9孔;第7排的1-3孔第5-6孔;第8排的1-12孔各加稀釋液30微升。

3. 取1號待檢血清30微升加入第1排第1孔,并將塑咀插入孔底,右手姆指輕壓彈簧1-2次混勻(避免產(chǎn)生過多的氣泡),從該孔取出30微升移入第2孔,混勻后取出30微升移入第3孔……直至第9孔混勻后取出30微升丟棄。此時第1排1-9孔待檢血清的稀釋度(稀釋倍數(shù))依次為:1:2(1)1:4(2)1:8(3)1:16(4)1:32(5)1:64(6)1:128(7)1:256(8)1:512(9)。取2號待檢血清加入第2排:取3號待檢血清加入第3排……均按上法稀釋,注意!每取一份血清時,必須更換塑咀一個。

4. 在血凝板的第7排第1孔加陰性血清30微升、對倍稀釋至第3孔,混勻后從該孔取出30微升丟棄。此時陰性血清的稀釋倍數(shù)依次為1:2(1)1:4(2)1:8(3)。第5-6孔為稀釋液對照。

5. 在血凝板的第8排第l孔加陽性血清30微升,對倍稀釋至第12孔,混勻后從該孔取出30微升丟棄。此時陽性血清的稀釋倍數(shù)依次為1:2-1:4096。

6. 被檢血清各孔、陰性對照血清各孔、陽性對照各孔、稀釋液對照孔均各加血凝抗原(充分搖勻,瓶底應無血球沉淀)30微升。

7. 將血凝板置于微量振蕩器上振蕩1-2分鐘,如無振蕩器,用手輕輕搖勻亦可,然后將血凝板放在白紙上觀察各孔紅血球是否混勻,不出現(xiàn)血球沉淀為合格。蓋上玻板,37℃下靜置1-1.5小時或常溫下3小時左右判定結(jié)果,也可延至翌日判定。

結(jié)果判斷

1. 對照試驗:應在對照試驗結(jié)果有效的前提下,來判定待檢血清樣本的結(jié)果。

陰性對照血清1:8孔,稀釋液對照孔,均應無凝集(血球全部沉入孔底形成邊緣整齊的小圓點),或僅出現(xiàn)“+”凝集(血球大部沉于孔底,邊緣稍有少量血球懸?。?。

陽性血清對照1:2–l:256各孔應出現(xiàn)“++~++++”凝集為合格,(少量血球沉入孔底,大部血球懸浮于孔內(nèi))。

2. 待檢血清:以呈現(xiàn)“++”凝集的zui大稀釋倍數(shù)為該份血清的抗體效價。例如1號待檢血清l-5孔呈現(xiàn)“++ ~++++”凝集,6-7孔呈現(xiàn)“++”凝集,第8孔呈現(xiàn)“+”凝集,第9孔無凝集,那么就可判定該份血清的口蹄疫抗體效價為1:128。

3. 抗體效價與抗感染的關系:接種口蹄疫疫苗的豬群免疫抗體效價達到1:128以上,牛群、羊群免疫抗體效價達到1:256以上為免疫合格。

注意事項

1.液體血凝抗原4-8℃保存(切勿凍結(jié)),有效期4個月;陰陽性對照血清;-15~-20℃保存,有效期1年。

2. 嚴重溶血或嚴重污染的血清樣品不宜檢測,以免發(fā)生非特異性反應。

3. 勿用90°和130°血凝扳,嚴禁使用一次性血凝板,以免誤判結(jié)果。

4. 本法可單獨檢測口蹄疫抗體水平,也可同步檢測口蹄疫免疫抗體水平,豬水泡病免疫抗體水平。

5. 用過的血凝板應及時在水下沖盡血球。再用蒸餾水或去離子水沖洗2次,甩干水份放37℃恒溫箱內(nèi)干燥備用。檢測用具應煮沸消毒,37℃干燥備用。血凝板太臟,可浸泡在5%鹽酸液內(nèi),48小時撈出后清水沖凈。

6. 每次檢測只做一份陰性、陽性和稀釋液對照。

“-”表示*不凝集成0–10%血球凝集。

“+”表示10-25%血球凝集“+++”表示75%血球凝集。

“++”表示50%血球凝集“++++”表示90-100%血球凝集。

7. 用不同批次的血凝抗原檢測同一份血清時,應事先用陽性血清準確測定各批次血凝抗原的效價,取抗原效價相同或相近的血凝抗原檢測待檢血清抗體水平的結(jié)果是基本*的,如果血凝抗原效價差別很大用來檢測同一血清樣品,肯定會出現(xiàn)檢測結(jié)果不*。

8. 收到本試劑盒時,應立即打開包裝,取出血凝抗原瓶,用力搖動,使粘附在瓶蓋上的紅細胞搖下,否則易出現(xiàn)沉渣,影響使用效果。

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