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Binax肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒

Binax肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒

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Binax肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品描述

肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒(膠體金法)使用說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒(膠體金法)

商品名稱:Binax NOW® Streptococcus pneumoniae Test

【包裝規(guī)格】22人份/盒。

【預(yù)期用途】

肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒(膠體金法)是一種體外快速免疫層析(ICT)試驗(yàn),用于檢測(cè)肺炎病人尿液和腦膜炎病人腦脊液(CSF)中的肺炎鏈球菌抗原,與培養(yǎng)等其他方法結(jié)合,用于肺炎球菌性肺炎和肺炎球菌性腦膜炎的輔助診斷。

肺炎鏈球菌是社區(qū)獲得性肺炎的主因,并且可能是不明原因社區(qū)獲得性肺炎的重要致病原1, 2。肺炎球菌性肺炎的病死率高達(dá)30%,這取決于菌血癥、年齡和潛在性疾病1, 3。如果未得到正確診斷和治療,肺炎鏈球菌感染可導(dǎo)致菌血癥、腦膜炎、心包炎、膿胸、暴發(fā)性紫癜、心內(nèi)膜炎和/或關(guān)節(jié)炎4, 5。

肺炎球菌性腦膜炎常導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)的腦損傷或腦死亡,它既可作為其他肺炎球菌感染的并發(fā)癥出現(xiàn),也可單獨(dú)出現(xiàn)6。各個(gè)年齡段人群均可感染,但更常見于5歲以下兒童、青少年和老年人7。病程進(jìn)展快速,數(shù)小時(shí)內(nèi)可從輕度疾病轉(zhuǎn)為昏迷,這就使得即刻做出診斷,立即動(dòng)用抗菌素進(jìn)行治療顯得尤為重要。盡管采用了適當(dāng)?shù)目股刂委煄滋旌筮€是會(huì)有20%-30%的肺炎球菌性腦膜炎病人會(huì)死掉6。病死率在小兒和高齡病人中甚至更高6。

Binax NOW®肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒(膠體金法)為肺炎球菌性肺炎的診斷提供了一種簡(jiǎn)便快速的診斷方法,該方法所用檢測(cè)樣品為尿液,尿液的收集、貯存和運(yùn)輸都非常方便,該實(shí)驗(yàn)通過對(duì)腦脊液進(jìn)行檢測(cè)也可對(duì)肺炎球菌性腦膜炎做出及時(shí)高度準(zhǔn)確的診斷。 

【檢驗(yàn)原理】

肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒(膠體金法)是一種薄膜免疫層析試驗(yàn),用于檢測(cè)人類尿液和腦脊液中肺炎球菌的可溶性抗原。兔抗肺炎鏈球菌抗體被吸附到硝酸纖維素膜上作為樣本線,對(duì)照抗體作為另一條線吸附到同一膜上。結(jié)合有可視粒子的兔抗肺炎鏈球菌抗體和抗種抗體干燥結(jié)合到惰性纖維支持物上,形成的結(jié)合物墊和帶條紋的膜結(jié)合到一起組成檢測(cè)條。檢測(cè)條和放拭子標(biāo)本的孔位于一個(gè)書形鉸鏈狀檢測(cè)卡的兩側(cè)。 

試驗(yàn)時(shí),將拭子浸入標(biāo)本中(尿液或腦脊液),取出,然后插入檢測(cè)卡中,從滴瓶中加入A試劑(一種緩沖液),將檢測(cè)卡閉合,使樣本和檢測(cè)條相觸。樣本中存在的肺炎球菌抗原與抗肺炎鏈球菌抗體結(jié)合物結(jié)合,形成的抗原結(jié)合物復(fù)合物被固定的抗肺炎鏈球菌抗體捕獲,形成樣本線。固定的對(duì)照抗體捕獲種屬抗體結(jié)合物,形成對(duì)照線。 

試驗(yàn)結(jié)果可通過紫紅色線的出現(xiàn)與否來解釋。陽性結(jié)果(取決于標(biāo)本中存在的抗原濃度)在15分鐘讀數(shù)時(shí),會(huì)檢測(cè)出樣本線和對(duì)照線。陰性結(jié)果,15分鐘讀數(shù)時(shí)只出現(xiàn)對(duì)照線,表示標(biāo)本中未檢測(cè)到肺炎鏈球菌抗原。如果對(duì)照線未出現(xiàn),不管標(biāo)本線出現(xiàn)與否,都視為無效結(jié)果。

【主要組成成分】

 = 1 \* GB3 ① 檢測(cè)卡       包被有純化的兔抗肺炎鏈球菌C-多糖抗體、用專門方法結(jié)合到抗肺炎鏈球菌抗體上的膠體金粒子、雞IgY、用專門方法結(jié)合到驢抗雞抗體上的膠體金粒子

 = 2 \* GB3 ② A試劑        枸椽酸鹽/帶有十二烷基磺酸鈉的磷酸鹽緩沖液,吐溫®20,疊氮鈉。 

 = 3 \* GB3 ③ 樣本拭子     于Binax NOW®肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒(膠體金法)(不接觸人體,用于蘸取已經(jīng)采集好的尿液或腦脊液)。不要使用其他拭子。

 = 4 \* GB3 ④ 陽性對(duì)照拭子  加熱滅活的肺炎鏈球菌抗原干燥結(jié)合到拭子上

 = 5 \* GB3 ⑤ 陰性對(duì)照拭子  肺炎鏈球菌陰性拭子

【儲(chǔ)存條件及有效期】

試劑盒儲(chǔ)存于2-30℃,有效期為24個(gè)月。

【樣本要求】

在做Binax NOW®肺炎鏈球菌抗原檢測(cè)試劑盒(膠體金法)前,將所有標(biāo)本平衡至室溫(15-30℃)。測(cè)試前,要將標(biāo)本輕輕旋勻。 

尿液(用于肺炎診斷)

將尿液收集在標(biāo)準(zhǔn)容器中。收集后,如果24小時(shí)內(nèi)測(cè)定,室溫保存(15-30℃)。此外,將尿液在2-8℃保存或冷凍保存,可存放14天。硼酸可用作防腐劑。

必要時(shí),可將尿液標(biāo)本用防漏容器在2-8℃或冷凍條件下運(yùn)送。 

腦脊液(用于腦膜炎診斷)

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)程序收集腦脊液,測(cè)試前腦脊液在室溫(15-30℃)只能貯存24小時(shí)。冷藏(2-8℃)或冷凍(-20℃)可貯存至1周。 

【檢驗(yàn)方法】

檢測(cè)肺炎球菌肺炎時(shí)用尿液標(biāo)本,檢測(cè)肺炎球菌性腦膜炎時(shí)用腦脊液標(biāo)本。

注:測(cè)試液性標(biāo)本時(shí)用3A試劑。

 

1.   將病人標(biāo)本和/或液狀對(duì)照品放至室溫(15-30℃),輕輕混勻。測(cè)試前從包裝袋中取出檢測(cè)卡平放。

2.   將1根Binax樣本拭子浸入要測(cè)試的標(biāo)本中,*浸沒拭子頭。如果拭子有滴水,將拭子靠在收集容器的邊上,排去多余的液體。

3.   檢測(cè)卡內(nèi)部的右手邊有兩個(gè)孔,將拭子插入底部的孔中(拭子孔),穩(wěn)步向前推,使整個(gè)拭子頭在上部的孔中可見,不要取出拭子。

4.   垂直持放A試劑瓶,高出檢測(cè)卡上方1/2到1英寸,慢慢向底部的孔中加入3滴A試劑。

5.   立即從檢測(cè)卡的右緣揭去粘附襯,封閉檢測(cè)卡,過15分鐘在窗口判讀結(jié)果。15分鐘后讀取的結(jié)果可能不準(zhǔn)確。然而,有些陽性病人不到15分鐘就出現(xiàn)可見樣品線。

注意:只能使用本試劑盒提供的樣本拭子,不要使用其它拭子。為方便起見,在拭子柄上做了切痕,在閉合檢測(cè)卡時(shí)可能會(huì)將拭子柄折斷。操作時(shí)不要使拭子柄從孔中脫出。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

陰性標(biāo)本

在窗口的上半部分將出現(xiàn)一條紫紅色對(duì)照線,表示結(jié)果陰性。對(duì)照線表示試驗(yàn)的檢測(cè)過程是正確的,只是未檢測(cè)到肺炎鏈球菌抗原。

 

尿液陰性:肺炎球菌推定為陰性,提示無現(xiàn)行或新近肺炎球菌感染。由于標(biāo)本中存在的抗原可能在檢測(cè)限以下,不能排除肺炎鏈球菌引起的感染。

腦脊液陰性:腦膜炎球菌推定為陰性。由于標(biāo)本中的抗原可能在檢測(cè)限以下,由肺炎鏈球菌引起的感染不能被排除。

紫紅色對(duì)照線

陽性標(biāo)本

將出現(xiàn)兩條紫紅色線,表示檢測(cè)到抗原??乖降偷臉?biāo)本可能出現(xiàn)一條暗淡的線。任何可見線都表示陽性。

 

尿液陽性:肺炎球菌陽性

腦脊液陽性:腦膜炎球菌陽性

   

紫紅色對(duì)照線

紫紅色樣本線

無效結(jié)果

如果沒有線條出現(xiàn),或僅出現(xiàn)樣本線,測(cè)定是無效的。

無效試驗(yàn)應(yīng)當(dāng)重做。

 

沒有線條出現(xiàn)

 

僅有樣本線

 

      

由于本研究是回顧性的,進(jìn)行測(cè)試的各種感染病人的數(shù)量是有限的,且各人的病史不祥,因此,不能排除存在肺炎鏈球菌混合感染的情況。當(dāng)用純培養(yǎng)進(jìn)行測(cè)試時(shí)(資料如下),這些微生物在NOW®試驗(yàn)中均未產(chǎn)生交叉反應(yīng)性。 

全微生物檢測(cè)

為了確定Binax NOW®試驗(yàn)的分析特異性,收集了144份交叉反應(yīng)物,包括與肺炎有關(guān)的微生物和那些可能作為正常菌群在泌尿生殖道發(fā)現(xiàn)的微生物,以及引起尿道感染的微生物。所有微生物都在106到109CFU/ml用Binax NOW®試驗(yàn)進(jìn)行了評(píng)估,在144例微生物中有143例無交叉反應(yīng)性,*陽性的微生物是緩和鏈球菌,由于它和Binax NOW®試驗(yàn)有共同抗原,交叉反應(yīng)是可預(yù)期的。緩和鏈球菌與心內(nèi)膜炎有關(guān),而非肺炎,不可能頻繁出現(xiàn)在NOW®試驗(yàn)測(cè)試人群中8。下列生物經(jīng)過測(cè)試且結(jié)果為陰性。當(dāng)檢測(cè)出不止一株時(shí),用數(shù)字列在括號(hào)內(nèi)。 

不動(dòng)桿菌(4)莢膜組織胞漿菌*(2)普通變形桿菌(2)

腺病毒*產(chǎn)酸克雷白菌 (2)斯氏普羅威登斯菌 糞產(chǎn)堿桿菌

肺炎克雷白菌(3)假單胞菌屬 (7)乳酸桿菌 (5)

呼吸道合胞病毒* 皮炎芽生菌*  嗜肺軍團(tuán)菌 鼻病毒*

百日咳鮑特菌  產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌  沙門菌 (4)卡他布蘭漢菌

Luteus細(xì)球菌 (2)黏質(zhì)沙雷氏菌 白色假絲酵母菌 (3)奧斯陸莫拉菌

鞘胺醇桿菌屬 multivorum 星形假絲酵母菌 摩根菌 金黃色葡萄球菌

厭氧球孢子菌* 堪薩斯分枝桿菌 葡萄球菌 (8)棒狀桿菌屬 (3)

結(jié)核分枝桿菌  寡養(yǎng)單胞菌屬 陰溝腸桿菌 (4)

支原體* (3)咽頰鏈球菌 ◊● avium腸球菌◊ 灰色奈瑟氏菌

牛鏈球菌 ◊ durans腸球菌◊ 淋病奈瑟氏菌

A群鏈球菌● 糞腸球菌 ◊ lactamica奈瑟氏菌 B群鏈球菌◊●

(8)大腸埃希氏菌 (8)腦膜炎奈瑟氏菌 C群鏈球菌◊●

Escherichia hemannii (2)多糖奈瑟菌  F群鏈球菌◊● 黃桿菌屬

(2)淺黃色奈瑟氏菌 G群鏈球菌◊●  陰道加德鈉氏菌  諾卡菌屬*

變異鏈球菌 ◊● 流感嗜血桿菌  (10)巴西副球孢子菌*

副血鏈球菌 ◊● 副流感病毒 *  (2)

血鏈球菌◊● 副流感暑血桿菌(2)

陰道毛滴蟲(2)

*來自CDC的純培養(yǎng),據(jù)認(rèn)定為高濃度。

◊非A非B鏈球菌(總株數(shù)是16)

●非D群鏈球菌(總株數(shù)是17)

全微生物檢測(cè)

除了在前瞻性研究中遇室的細(xì)菌和病毒感染, Binax搜集了一組潛在交叉反應(yīng)物,包括zui常見的細(xì)菌性和病毒性腦膜炎致病因子,在 Binax NOW®試驗(yàn)中對(duì)濃度范圍從107到108CFU/ml的所有細(xì)菌進(jìn)行了評(píng)估,對(duì)病毒在大于或等于105I.U./ml水平進(jìn)行了測(cè)試。 Binax NOW®試驗(yàn)顯示的特異性是100%,所有參加測(cè)試的病毒和細(xì)菌產(chǎn)生的結(jié)果均為陰性。

Burkitt,s 淋巴瘤(Epstein Barr)     嗜血桿菌

柯薩奇A7病毒                非典型(35891)

柯薩奇B3病毒                單純皰疹病毒1型

??刹《?、                   單純皰疹病毒2型

糞腸球菌                     產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌(19115)

A群流感嗜血桿菌             產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌(19424)

B群流感嗜血桿菌             腦膜炎奈瑟氏菌A血清型

C群流感嗜血桿菌           0  腦膜炎奈瑟氏菌B血清型

D群流感嗜血桿菌             腦膜炎奈瑟氏菌C血清型

E群流感嗜血桿菌             腦膜炎奈瑟氏菌D血清型

F群流感嗜血桿菌             腦膜炎奈瑟氏菌L血清型

流感嗜血桿菌                 口腔鏈球菌(35037)

非典型(51997) 

干擾物質(zhì)

有較高白細(xì)胞(1×104細(xì)胞/ml),紅細(xì)胞(30細(xì)胞/μl)蛋白(3g/dl),膽紅素(100μg/ ml)的腦脊液標(biāo)本用Binax NOW®肺炎鏈球菌檢測(cè)試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià),未發(fā)現(xiàn)對(duì)試驗(yàn)性能有影響。 

重復(fù)性研究

分別在3家實(shí)驗(yàn)室對(duì)一組包括陰性、弱陽性、陽性樣本的標(biāo)本單盲編號(hào),用 Binax NOW®肺炎鏈球菌檢測(cè)試驗(yàn)進(jìn)行單盲研究。3天中對(duì)每一樣本進(jìn)行多次測(cè)定。270份樣本100%得到了預(yù)期結(jié)果。

【注意事項(xiàng)】

對(duì)照拭子需要加6A液,病人標(biāo)本需要加3A

1.  無效結(jié)果,無對(duì)照線出現(xiàn),A液加量不足時(shí)會(huì)出現(xiàn)。一定要加入足夠量液體,將小瓶垂直持于拭子孔上方1/2-1英寸處,慢慢滴加,使液體自由落下。

2.  僅供體外診斷用。

3.  檢測(cè)卡密封在包裝袋中,如果包裝破損或開封,請(qǐng)不要使用。用前從包中取出檢測(cè)卡,不要觸摸檢測(cè)卡的反應(yīng)區(qū)。

4.  不要使用過期試劑。

5.  不要將不同批號(hào)試劑混合使用。

6.  使用試劑盒中提供的拭子。不要使用其他拭子。

7.  盡管制備對(duì)照拭子的溶液用標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行了滅活,病人樣本、對(duì)照品和檢測(cè)卡仍應(yīng)視為能傳播疾病的物質(zhì),遵照已建立的預(yù)防微生物危害的措施做適當(dāng)處理。

8.  此試驗(yàn)所用尿液標(biāo)本不要求必須是清潔的,因此,用于該試驗(yàn)的標(biāo)本可能不適于做細(xì)菌培養(yǎng)。

9.  一旦拭子浸入腦脊液標(biāo)本中,樣本不再是無菌的,可能不再適于做細(xì)菌培養(yǎng)。如果腦脊液標(biāo)本要做培養(yǎng),要么先做培養(yǎng),要么將腦脊液標(biāo)本分開。

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