丹麥SSI鏈球菌血清分型說(shuō)明書(shū)
| 型 號(hào)： | 丹麥血清 |
| 報(bào) 價(jià)： |  |
丹麥國(guó)家血清研究院的診斷用鏈球菌抗血清用于通過(guò)Neufeld方法1和Lancefield方法2,3對(duì)鏈球菌進(jìn)行定性識(shí)別和分型。丹麥SSI鏈球菌血清分型說(shuō)明書(shū)，廣州健侖生物公司提供產(chǎn)品及服務(wù)
- 產(chǎn)品描述
丹麥SSI鏈球菌血清分型說(shuō)明書(shū)
應(yīng)用
丹麥國(guó)家血清研究院的診斷用鏈球菌抗血清用于通過(guò)Neufeld方法1和Lancefield方法2,3對(duì)鏈球菌進(jìn)行定性識(shí)別和分型。
簡(jiǎn)介
丹麥國(guó)家血清研究院的鏈球菌抗血清在兔體內(nèi)培養(yǎng)。鏈球菌抗血清可用于對(duì)A、B、C、D和L群鏈球菌進(jìn)行識(shí)別以及對(duì)B群鏈球菌和豬鏈球菌進(jìn)行血清分型?？寡骞?yīng)規(guī)格為1 mL瓶裝產(chǎn)品（以*作為防腐劑）。血清生產(chǎn)過(guò)程中在需要時(shí)采用吸附方法排除交叉反應(yīng)。
原理
Lancefield方法：當(dāng)一種酸性抗原提取物與直接針對(duì)細(xì)菌表面成分的特異性抗血清混合時(shí)，細(xì)胞之間將通過(guò)抗原-抗體鍵連接在一起而形成聚集（沉淀）。當(dāng)在毛細(xì)管內(nèi)反應(yīng)時(shí)，這種現(xiàn)象可以用裸眼直接觀察到。
Neufeld方法：通過(guò)將特異性抗血清與一種鏈球菌培養(yǎng)物混合，可以確定莢膜抗原。莢膜反應(yīng)是鏈球菌莢膜多糖與其同源性抗體之間發(fā)生原位免疫沉淀反應(yīng)的結(jié)果。顯微鏡下陽(yáng)性反應(yīng)表現(xiàn)為莢膜可見(jiàn)和鏈球菌凝集。莢膜的大小取決于血清型和生長(zhǎng)條件。
需要但未提供的材料
Neufeld檢測(cè)：
5%血液瓊脂平板
接種環(huán)
移液管或任何可以移取液滴的其它用具
載玻片和蓋玻片
浸油
pH 7.4的鹽水
相差顯微鏡（放大100 X，油浸物鏡）
Lancefield檢測(cè)：
5%血液瓊脂平板
葡萄糖肉湯
接種環(huán)
離心機(jī)
移液管或任何可以移取液滴的其它用具
0.06N, 0.1N和0.2N HCl溶液
水浴（100ºC）
酚紅（指示劑）
0.2N NaOH溶液
毛細(xì)管
步驟
通用
每一血清型將在Lancefield方法或Neufeld方法中顯示反應(yīng)陽(yáng)性（在血清出廠證書(shū)上將指示優(yōu)先選擇的方法）。當(dāng)與陰性對(duì)照比較時(shí)，通常結(jié)果會(huì)更加明顯。
Neufeld檢測(cè)
1. 將一小滴（3-6 μL）鹽水滴在玻片上。
2. 從血液瓊脂平板上轉(zhuǎn)移小量培養(yǎng)物到玻片上，然后與鹽水混合均勻。
3. 加入等量抗血清，然后與液滴充分混合。
4. 立即在混合物上加蓋蓋玻片（必須保持濕潤(rùn)）。
5. 在相差顯微鏡下觀察混合物。反應(yīng)可在半小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定（在未干燥的前提下）。
6. 如可見(jiàn)莢膜（細(xì)菌表現(xiàn)腫脹），則反應(yīng)為陽(yáng)性。
Lancefield檢測(cè)（改良版本）
使鏈球菌于5%血液瓊脂平板上生長(zhǎng)過(guò)夜。
1. 將少量菌落加入6 mL葡萄糖肉湯，然后在35-37ºC下培養(yǎng)過(guò)夜。
2. 將懸液以3000 rpm轉(zhuǎn)速離心10分鐘，然后移去上清液。
3. 將0.06N、0.1N或0.2N 的HCl溶液 0.1 mL加入細(xì)菌沉淀物中（在血清出廠證書(shū)上將指示優(yōu)先選擇的方法）。
4. 將酸性懸液置于水?。?/span>100ºC）中加熱15分鐘。
5. 在自來(lái)水中冷卻酸性懸液。
6. 通過(guò)滴入0.2N NaOH溶液直至液體變?yōu)樽?/span>/橙色［使用酚紅作為pH指示劑，紅色（pH > 8.2）－黃色（pH < 6.4）］調(diào)整pH值至7左右。
7. 將懸液以3000 rpm的轉(zhuǎn)速離心10分鐘，然后將上清液（酸性抗原提取物）轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的玻片上。
8. 使用毛細(xì)管吸取等量的抗血清（首先）和酸性抗原提取物（其次）。必須將抗血清置于毛細(xì)管上部，以便使其擴(kuò)散通過(guò)酸性提取物。
9. 陽(yáng)性反應(yīng)為發(fā)生沉淀。正對(duì)光源讀取結(jié)果。
保存條件與有效期限
避光保存于2-8°C。有效期限見(jiàn)包裝。有時(shí)在長(zhǎng)期保存后可見(jiàn)因脂蛋白沉淀引起的混濁。采用離心（10,000g）然后過(guò)濾除菌（0.22 μm）的方法即可除去沉淀和/或污染物。
丹麥SSI鏈球菌血清分型說(shuō)明書(shū)
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