- 產(chǎn)品描述
甲型H1N1流感病毒核酸檢測試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
產(chǎn)品規(guī)格:50T/盒;
保存條件:避光 -20度 保存。
我司還提供各種流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠狀病毒、輪狀病毒、桿菌、鏈球菌、熱帶病毒等等核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法),還有各種原料和質(zhì)控品,隨時歡迎您的來電: 楊
甲型H1N1流感病毒核酸檢測試劑盒
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鐵蛋白嘅提取
1)配制2%鏹水銨液,并以1mol/L嘅NaOH或者HCl調(diào)pH值,啱啱為5.85。攞1g鐵蛋白溶于100ml嘅2%硫酸銨液中。
2)加20%硫酸鎘,令zui終濃度為5%,撈勻,4℃過夜。
3)1500g離心(4℃)2h,去上清。仍加2 %鏹水銨至100ml,撈勻,離心,抹得甩不純沉渣。
4)于上清液中重新加20%硫酸鎘,重復(fù)步驟⑵,離心,去上清。
5)檢查沉渣,置顯微鏡下檢查,應(yīng)具有典型嘅黃褐色結(jié)晶,結(jié)晶為六角形,雙一四點結(jié)構(gòu),如結(jié)晶唔典型,應(yīng)繼續(xù)重復(fù)以上步驟。
6)以少量嘅蒸餾水溶解,再加50%飽和鏹水銨溶液,令之沉淀,離心,去上清。
7)重復(fù)步驟⑹一次。
8)以少量蒸餾水溶解,常水透析24h后,以0.05mol/L pH7.5 PBS透析24h。
9)100000r/min離心2h,抹得甩上部冇色上清液(約3/4總量),置4℃過夜。
10)用微孔濾膜(孔徑0.45μm)隔,令鐵蛋白含量為65mg/ml-75mg/ml,分裝,4℃保存唔凍做保存,以免鐵蛋白結(jié)構(gòu)遭破壞。
2.鐵蛋白-抗體交聯(lián)法
1)以0.3Mol/L pH 9.5硼酸鹽緩沖液將鐵蛋白稀釋成20mg/ml-25mg/ml。
2)以一∶1000(W/W)嘅比例加XC液室溫攪拌45min,離心去沉淀。
3)以0.3Mol/L pH 9.5硼酸鹽緩沖液將提純lgG襯成5mg/ml,以一∶4嘅比例(V/V)加IgG與鐵蛋白-XC液,4℃攪拌48h。
4)以0.1Mol/L式碳銨溶液透析過夜,以除去多余嘅異氰酸鹽,再以0.05Mol/l pH 7.5 PBS透析,令pH值恢復(fù)到生理水平。
5)超速離心以1.00×105g離心5h,去上清,沉淀以0.05Mol/L PBS懸浮,再次離心,以除去未結(jié)合嘅IgG。
6)以血清學(xué)同免疫學(xué)方法測定結(jié)合抗體嘅特異性、免疫活性與及識認(rèn)效應(yīng),如果用步驟嚴(yán)格,結(jié)果系滿意嘅。
3.鐵蛋白-抗體結(jié)合物處理標(biāo)本
1)將標(biāo)本以5%福爾馬林pH 7.2(4℃)PBS液入墻40min-60min。
2)用凍嘅PBS液洗滌,離心。
3)如系組織蚊,就喺解剖顯微鏡下切更忽,放入試管中,加埋鐵蛋白-抗體結(jié)合物置室溫20min,不時振蕩,
4)以凍PBS液洗滌三次,離心。
5)沉淀以2.5%戊二醛入墻20min,以PBS洗滌。
6)再以鋨酸入墻,脫水包壅。
都可以先超薄切片,再進(jìn)行鐵蛋白-抗體結(jié)合物染色。
唔識用如下:
1)將培養(yǎng)細(xì)胞以1%福爾馬林PBS液入墻(4℃)。
2)PBS液洗滌離心。
3)以0.5ml,30%牛血清蛋白PBS液懸浮置入膠透析膜袋中,再將袋置于嗍水劑粉末上,對牛血清白蛋白成膠狀物時,將透析袋移至2%戊二醛PBS液(pH7.5)中入墻3h。
4)拎出,切忽,以PBS液洗滌。
5)置干燥器中以矽膠糠。
6)包壅、切片、喺水上有冇收集切片置于經(jīng)4%牛血清白蛋白PBS液處理嘅摟有膠膜嘅在網(wǎng)上(牛血清白蛋白嘅處理在于少鐵蛋白結(jié)合物非特異性吸附于在網(wǎng)上)。
7)滴一滴鐵蛋白-抗體結(jié)合物于在網(wǎng)上。
8)5min后,浮絲網(wǎng)于PBS液面,標(biāo)本口當(dāng)面同下,以除去多余嘅結(jié)合物。
9)凍做后,滴一滴醋酸雙氧鈾或者氫氧化鉛以復(fù)染。
10)水洗、晾干、電鏡觀察。